Infecția cu rotavirus

Gripă

Infecția cu rotavirus sau gripa intestinală / gastrică este o boală infecțioasă cu tratament simptomatic. Infecția cu rotavirus este cea mai frecventă la copii.

Infecția cu rotavirus prezintă un pericol deosebit pentru copii, deoarece majoritatea infecțiilor apar în această populație.

Agentul cauzator al infecției cu rotavirus

Infecția este cauzată de rotavirusuri - virusuri din familia Reoviridae, care sunt similare în compoziția antigenică.

Sursa infecției

Sursa infecției este o persoană bolnavă. Cea mai periculoasă din punct de vedere al transmiterii infecției este pacientul în primele 3 - 5 zile de manifestare clinică a infecției cu rotavirus, deoarece în această perioadă conținutul de virus în fecalele excretate este cel mai mare.

Mecanism de transmisie

Principalul mecanism al transmiterii virusului este fecal-orală, mai puțin frecvent - calea de contact a familiei de propagare prin transferul de rotavirus cu obiecte infectate. În special periculoase în acest sens sunt produsele lactate. Temperaturile scăzute, de obicei, nu distrug virusul, astfel încât depozitarea alimentelor în frigider nu împiedică dezvoltarea infecției cu rotavirus.

Perioada de infecție cu rotavirus epidemic

Izbucnirea bolii apare în perioada toamnă-iarnă, totuși, în alte sezoane, pot exista și cazuri de apariție a bolii. De regulă, răspândirea și apariția simptomelor caracteristice ale infecției cu rotavirus este însoțită de apariția unei epidemii de gripă, prin urmare, oamenii sunt infectați cu rotavirus mai frecvent cunoscut sub numele de "gripă intestinală".

patogenia

După intrarea în corpul uman, virusul intră în celulele mucoasei intestinului subțire, ceea ce provoacă distrugerea vililor intestinului. Sinteza enzimelor specifice, precum și încălcarea funcției secretorii a mucoasei intestinale, conduc la diaree severă și deshidratare a corpului datorită cantității mari de electroliți și a apei care intră în lumenul intestinal.

Simptomele infecției cu rotavirus:

  • congestie nazală;
  • durere în gât;
  • tuse;
  • dureri abdominale;
  • greață, vărsături, diaree;
  • cefalee, febră.

clinică:

Principalele perioade de infecție cu rotavirus:

  • perioada de incubație durează 1-2 zile;
  • perioada acută durează 3-7 zile;
  • recuperare, dureaza 4-5 zile.

Boala se caracterizează printr-un debut acut, dar este posibilă prezența unei perioade prodromale (aproximativ 2 zile). Poate provoca indispoziție, slăbiciune generală, cefalee, oboseală crescută, pierderea poftei de mâncare, senzații neplăcute și rușine în stomac. În plus, este posibilă apariția manifestărilor de boală din partea tractului respirator superior: congestie nazală, durere în gât, tuse ușoară.

Imaginea clinică generală include sindroamele de intoxicare, gastroenterită și leziuni ale tractului respirator superior.

Manifestările legate de sindromul gastroenterită includ: dureri puternice în abdomen, durere, mai ales la nivelul abdomenului, greață, vărsături, diaree. Diareea cu infecție cu rotavirus are o consistență spumoasă apoasă și are culoarea galbenă sau verzui galben.

Manifestări ale sindromului de intoxicare: oboseală, slăbiciune, cefalee. În cazuri severe: amețeli, leșin.

Înfrângerea tractului respirator superior este caracterizată de un nas curbat, congestie nazală, durere în gât, tuse. Zev, când are o culoare roșie aprinsă.

Complicații și mortalitate

Formele severe ale bolii, însoțite de deshidratare severă, se caracterizează prin dezvoltarea insuficienței cardiovasculare, chiar și a decesului (în 2-3% din cazuri). După infectare, se produce o imunitate instabilă, care slăbește în timp, astfel încât re-infectarea este posibilă.

Diagnosticul infecției cu rotavirus

Diagnosticul infecției cu rotavirus este posibil numai atunci când se detectează rotavirus la om folosind metode de diagnostic de laborator, cum ar fi reacția în lanț a PCR - polimerază, RPHA - reacția de hemaglutinare pasivă, CSC - legarea complementului, imunofluorescența și multe altele.

Numărul total de sânge va arăta leucocitoză cu o deplasare neutrofilă la stânga, cu ESR crescută - în perioada acută. Perioada de recuperare se caracterizează prin normalizarea imaginii sanguine. Analiza de urină va arăta în cantități mici proteine, leucocite și celule roșii din sânge, cilindri hialini.

Infecția cu rotavirus - tratamentul gripei intestinale la adulți și copii

Tratamentul este simptomatic, deoarece nu există medicamente antirotavirus specifice pentru combaterea rotavirusului.

Principiile tratamentului infecției cu rotavirus:

  1. Izolarea unui pacient cu infecție cu rotavirus
  2. Lupta împotriva deshidratării. Este de dorit să se utilizeze soluții speciale de sare pentru aceasta, de exemplu, rehidron, soluție salină. Acestea se utilizează în tratamentul pacientului în spital, dar poate fi pregătită o soluție salină pentru a restabili starea normală a acidului-bază a corpului: 1 linguriță până la 1 litru de apă. Se recomandă să beți multă apă minerală.
  3. Lupta împotriva temperaturii trebuie să înceapă la o temperatură de 38, 5 și peste. În același timp, în funcție de tipul de febră, este necesar să se utilizeze metode fizice pentru reducerea temperaturii, de exemplu, frecarea corpului cu apă, și chimicale - luând medicamente specifice, la copii este mai bine să folosiți lumânări.
  4. Acceptarea preparatelor enzimatice, a agenților adsorbiți și a agenților astringenți (carbon activ, polisorb), preparate bacteriene lactice.
  5. Este interzisă administrarea de analgezice pentru durere în abdomen.

Indicatii pentru trimiterea la spital pentru infectia cu rotavirus:

  • deteriorare progresivă, diaree prelungită;
  • apariția de noi simptome.

Dieta pentru infectia cu rotavirus:

Dieta include evitarea laptelui și a produselor lactate, inclusiv a produselor lactate. Este indicat să se includă în dieta găină de pui sau orez, fiartă în apă fără a adăuga ulei. Este necesar să se mănânce în porții mici cu pauze. Se recomandă limitarea consumului de alimente bogate în carbohidrați.

Prevenirea infecției cu rotavirus

Măsurile preventive cheie pentru infecția cu rotavirus includ:

  • Împiedicarea introducerii virusului în organism, inclusiv izolarea bolii, spălării periodice a mâinilor, consumarea de produse dovedite și de înaltă calitate, utilizarea apei distilate, spălarea legumelor și a fructelor;
  • controlul sanitar al instalațiilor de catering și al produselor din magazine, piețe.

Înainte de a utiliza informațiile furnizate de site-ul medportal.org, vă rugăm să citiți termenii acordului de utilizare.

Acordul utilizatorului

Site-ul medportal.org oferă servicii care fac obiectul condițiilor descrise în acest document. Începând să utilizați site-ul web, confirmați că ați citit termenii prezentului acord de utilizator înainte de a utiliza site-ul și acceptați integral termenii acestui acord. Vă rugăm să nu utilizați site-ul web dacă nu sunteți de acord cu acești termeni.

Descrierea serviciului

Toate informațiile afișate pe site sunt doar pentru referință, informațiile preluate din surse deschise sunt de referință și nu sunt publicitate. Site-ul medportal.org oferă servicii care permit utilizatorului să caute medicamente în datele obținute de la farmacii, ca parte a unui acord între farmacii și medportal.org. Pentru ușurința utilizării datelor site-ului cu privire la droguri, suplimentele alimentare sunt sistematizate și aduse la o singură ortografie.

Site-ul medportal.org oferă servicii care permit utilizatorului să caute clinici și alte informații medicale.

limitarea răspunderii

Informațiile plasate în rezultatele căutării nu reprezintă o ofertă publică. Administrarea site-ului medportal.org nu garantează exactitatea, completitudinea și relevanța datelor afișate. Administrarea site-ului medportal.org nu este responsabil pentru pierderea sau deteriorarea pe care le poate suferi de acces sau incapacitatea de a accesa site-ul sau din utilizarea sau incapacitatea de a utiliza acest site.

Prin acceptarea termenilor acestui acord, înțelegeți și sunteți de acord că:

Informațiile de pe site sunt doar pentru referință.

Administrarea site-ului medportal.org nu garantează lipsa de erori și discrepanțe în ceea ce privește declarația pe site și disponibilitatea reală a bunurilor și a prețurilor pentru bunurile din farmacie.

Utilizatorul se angajează să clarifice informațiile de interes prin telefon la farmacie sau să utilizeze informațiile furnizate la discreția sa.

Administrarea site-ului medportal.org nu garantează absența erorilor și discrepanțelor legate de programul de lucru al clinicilor, detaliile lor de contact - numerele de telefon și adresele.

Nici Administrația site-ului medportal.org, nici nicio altă parte implicată în procesul de furnizare a informațiilor nu sunt responsabile pentru eventualele daune sau daune pe care le-ați suferit de la utilizarea pe deplin a informațiilor conținute pe acest site web.

Administrarea site-ului medportal.org se angajează și se angajează să depună eforturi suplimentare pentru a minimiza discrepanțele și erorile din informațiile furnizate.

Administrarea site-ului medportal.org nu garantează absența unor defecțiuni tehnice, inclusiv în ceea ce privește funcționarea software-ului. Administrarea site-ului medportal.org se angajează cât mai curând posibil să depună toate eforturile pentru a elimina orice eșecuri și erori în cazul apariției lor.

Utilizatorul este avertizat ca administrarea site-ului medportal.org nu este responsabila pentru vizitarea si utilizarea resurselor externe, link-uri catre care pot fi continute pe site, nu ofera aprobarea pentru continutul lor si nu este responsabil pentru disponibilitatea lor.

Administrarea site-ului medportal.org își rezervă dreptul de a suspenda site-ul, de a-și schimba parțial sau complet conținutul, pentru a modifica acordul utilizatorului. Astfel de modificări se fac numai la discreția Administrației fără notificare prealabilă către Utilizator.

Recunoașteți că ați citit termenii acestui Acord de utilizare și că acceptați integral termenii acestui Acord.

Informațiile publicitare despre care plasarea pe site are un acord corespunzător cu agentul de publicitate este marcată ca "publicitate".

Infecția cu rotavirus

Infecția cu rotavirus (gastroenterita rotavirusă) este o boală infecțioasă acută cauzată de rotavirusuri, caracterizată prin simptome de intoxicație generală și leziuni ale tractului gastrointestinal cu dezvoltarea gastroenterită.

Codul ICD-10
A08.0. Enterita rotavirusă.

Etiologia (cauzele) infecției cu rotavirus

Agentul cauzal este un membru al familiei Reoviridae, un gen de rotavirus (rotavirus). Numele se bazează pe similitudinea morfologică a rotavirusurilor cu roata (din latina "rota" - "roata"). Sub microscopul electronic, particulele virale arată ca roți cu un butuc larg, spițe scurte și o margine subțire clar definită. Un virion rotavirus cu un diametru de 65-75 nm constă dintr-un centru dens de electroni (nucleu) și două cochilii de peptide: o capsidă exterioară și una interioară. Miezul de 38-40 nm conține proteine ​​interne și material genetic reprezentat de ARN dublu catenar. Genomul de rotavirusuri la oameni și animale constă din 11 fragmente, care este probabil motivul diversității antigenice a rotavirusurilor. Replicarea rotavirusurilor în corpul uman apare exclusiv în celulele epiteliale ale intestinului subțire.

Infecția cu rotavirus, vedere în microscop electronic

Patru antigeni principali au fost găsiți în rotavirus; principalul este antigenul de grup, proteina capsidului intern. Luând în considerare toți antigienele specifice grupului, rotavirusurile sunt împărțite în șapte grupe: A, B, C, D, E, F, G. Cele mai multe rotavirusuri umane și animale aparțin grupului A, în care se disting subgrupurile (I și II) și serotipurile. Subgrupul II include până la 70-80% din tulpinile izolate de la pacienți. Există dovezi ale unei eventuale corelații a anumitor serotipuri cu severitatea diareei.

Rotavirusurile sunt rezistente la factorii de mediu: în apă potabilă, corpuri de apă deschise și ape reziduale, acestea persistă până la câteva luni, pentru legume - 25-30 zile, pentru bumbac, lână - timp de până la 15-45 zile. Rotavirusurile nu sunt distruse prin congelare repetată, sub acțiunea soluțiilor de dezinfectare, eter, cloroform, ultrasunete, dar mor când sunt fierte, tratate cu soluții cu un pH mai mare de 10 sau mai puțin de 2. Condiții optime pentru virusuri: temperatura 4 ° C și înaltă (> 90% scăzut (Autor: Bolile infecțioase: conducere națională, editat de ND Yuschuk, Yu Y. Vengerov.

Diagnosticul infecției cu rotavirus

susţin
Șef adjunct
Șef epidemiologic
Departamentul Ministerului Sănătății al URSS
G.G.ONISCHENKO

7 martie 1989 N 15-6 / 6

Infecția cu rotavirus

(RECOMANDĂRI METODICE)

Institutul de Poliomielita si Encefalita Virala, Academia de Stiinte Medicale a URSS.

Institutul de Cercetare a Epidemiologiei al URSS Ministerul Sănătății;

Institutul de Cercetări de Epidemiologie și Microbiologie. GN Gabrievskogo Ministerul Sănătății al RSFSR;

Asociația de producție științifică "Rostepidkompleks";

Institutul de Cercetare Științifică din Uniune a Dezinfecției și Sterilizării Ministerului Sănătății al URSS.

Ghidurile sunt destinate practicanților și cercetătorilor din cadrul autorităților și instituțiilor din domeniul sănătății.

Human rotavirus face parte dintr-un grup de virusuri animale asemănătoare unul cu celălalt, care, pe lângă acesta, include virusul diareei de vițel nebraska (NCDV), virusul diareei epizootice a șoarecilor tineri (EDJM), virusul maimuță (SA-II), virusul provenit din conținutul intestinal al oilor și bovine (0), precum și agenții patogeni ai porcilor, mânzilor, căței și a altor animale de diaree. Toți acești viruși au aceeași dimensiune și formă și sunt apropiați unul de celălalt în termeni antigenici.

Animalele rotavirus cresc bine în cultura de țesut, prin urmare, au fost izolate și studiate înainte de rotavirusul uman. Rotavirusurile de viței și maimuțe, datorită proximității lor antigenice față de rotavirusul uman, au fost folosite pentru a stabili rolul lor etiologic în gastroenterită acută și au fost utilizate până în prezent în diagnosticarea serologică și pentru a obține imunoreagenți.

Rotavirul uman a fost detectat prin microscopie electronică în celulele epitelului duodenal și în extractele de fecale de la pacienții tipici, unde este adesea conținut în concentrații foarte semnificative (până la 10 particule în 1,0 g de fecale). Rotavirusul virion este o particulă sferică cu două capse (acoperită cu o teacă de proteine ​​cu două straturi) cu diametrul de 70 - 75 nm, conține ARN de acid ribonucleic (11 segmente dublu catenare), are o densitate plutitoare în clorură de cesiu de 1,36 g / cm cu coeficientul de sedimentare 500 - 530 S

Conform caracteristicilor disponibile, rotavirusul uman, împreună cu virusurile animale enumerate mai sus, a fost clasificat ca un gen rotavirus al familiei Reoviridae. Numele "rotavirus" este derivat din rotația latină - o roată pe care o particulă a unui virus seamănă cu preparatele microscopice electronice.

În funcție de specificitatea antigenului, detectată prin ELISA, rotavirusurile sunt împărțite în două subgrupe (denotate prin cifre romane - I și II) și prin specificitate, detectate în reacția de neutralizare, cu 4 (și, eventual, mai mult) serotipuri 2, 3, 4). Specificitatea subgrupului anumitor rotavirusuri este determinată de proteina principală a capsidului intern, iar specificitatea lor serotipică este determinată de glicoproteina capsidului extern. Rotavirusurile de tip nou (așa-numitele pararotavirusuri) care nu au un antigen specific grupului au fost recent descoperite.

Infecția cu rotavirus este larg răspândită. Informații despre identificarea sa au fost publicate în Australia, Marea Britanie, RDG, Canada, India, Spania, SUA, Franța, Japonia și multe alte țări. În Uniunea Sovietică, bolile de gastroenterită cu rotavirus au fost înregistrate la copii și adulți într-o serie de regiuni ale RSFSR, Transcaucaziei, Ucrainei, statelor baltice, Asiei Centrale și altor teritorii. În rândul copiilor și adulților, infecția cu rotavirus se poate manifesta sub forma unor cazuri sporadice, a bolilor locale de grup și a focarelor de masă cu acoperire a diferitelor grupuri de populație pe zone mari. Dintre pacienții spitalizați cu infecții intestinale acute, proporția adulților cu gastroenterită rotavirusă este de 10-15%, copii cu 15-27% sau mai mult. Datele din literatura cu privire la izolarea rotavirusului (antigenului) la copiii și adulții sănătoși sunt foarte contradictorii: de la 0-0,5 până la 42% la copii și de la 0% la 7% sau mai mult la adulți. Infecția cu rotavirus este înregistrată pe tot parcursul anului. Cu toate acestea, peste 70% dintre pacienți sunt detectați în sezonul rece. În perioada de primăvară-primăvară, se înregistrează, de asemenea, majoritatea focarelor de infecție cu rotavirus în rândul populației, precum și bolile de grup în rândul nou-născuților și al copiilor prematuri, al copiilor grupurilor organizate, al persoanelor în vârstă. Nu au existat diferențe semnificative în distribuția infecțiilor cu rotavirus (atât copii cât și adulți) pe sexe.

Sursa de infecție în infecțiile intestinale acute ale etiologiei rotavirusului este adulți și copii infectați - pacienți cu o formă manifestă de infecție sau rotavirusuri secretoare asimptomatice cu fecale. În același timp, copiii din primul an de viață sunt adesea infectați de la mamele infectate cu rotavirus, iar copiii mai mari și adulții din copiii grupurilor organizate de copii. Infecția oamenilor de la animale nu este dovedită, deși nu este exclusă posibilitatea de a fi supuși. În prezent, rotavirusurile de serotipuri diferite se găsesc în excreția a aproape 50 de specii de animale și păsări cu semne pronunțate de diaree și fără ele.

Rotavirusurile la pacienți și la persoanele fără manifestări clinice ale bolii sunt în prezent prezente doar în fecale. Pacienții secretă rotavirusuri în mediu, începând cu prima zi de boală, în timp ce la toți pacienții sa detectat în primele cinci zile de boală cantitatea maximă de agent patogen din fecale (până la 10 - 10 particule virale per 1 g), ceea ce determină cel mai mare risc epidemiologic al pacienților față de ceilalți această perioadă de boală. În următoarele 6 până la 10 zile, eliberarea de rotavirusuri cu fecalele pacienților scade brusc pe măsură ce scaunul se normalizează. Durata medie a excreției de rotavirusuri de către pacienți este de 7-8 zile, dar la unii pacienți această perioadă poate dura până la 20-30 de zile. Persoanele fără manifestări clinice ale bolii pot elibera pe termen lung rotavirusuri cu fecale - până la câteva luni sau mai mult (perioada de observație).

Principalul mecanism de transmitere a rotavirusurilor este fecal-oral, care se realizează pe calea apei, a alimentelor și a căilor de transport interne. În cazul bolilor sporadice și locale, infecția cu rotavirusuri apare predominant prin mijloace de uz casnic. Aceasta contribuie la o doză patogenică foarte mică de rotavirusuri (în cadrul a 10 particule virale). S-a stabilit că la diferite situri de mediu, rotavirusurile mențin viabilitatea de la 10-15 zile (în funcție de temperatură și umiditate) la o lună; în fecale de la câteva săptămâni la șapte luni.

În prezent, focurile de apă și de alimente ale infecției cu rotavirus sunt înregistrate în țara noastră și în străinătate. Rotavirusurile se găsesc în apele râurilor, lacurilor, mărilor, apelor subterane, apei de la robinet, anumitor produse alimentare (lapte, etc.).

Este posibilă implementarea, în unele cazuri, a picăturilor de picurare, a prafului și a altor căi de rotavirus.

Rotavirusurile sunt, de asemenea, cunoscute ca fiind unul dintre principalii agenți etiologici în focarele nosocomiale (nosocomiale) de gastroenterită acută. În spitalele cu profil diferit, până la 50-60% dintre copiii bolnavi se pot infecta. Există cazuri de focare în casele de maternitate. Deseori afectează copiii care se hrănesc artificial, suferă de boli acute și cronice, cu diferite tipuri de imunodeficiență.

Sensibilitatea imunității. Oamenii din toate grupele de vârstă sunt sensibili la rotavirus. Cea mai mare susceptibilitate este observată la copiii cu vârsta de 6 luni. până la 2 ani. Anticorpii la rotavirusuri sunt detectați la 50-60% dintre copii în primul an de viață, la vârsta de peste 3 ani - mai mult de 90% și la aproape toți adulții. Cu toate acestea, conform literaturii, prezența anticorpilor în ser indică în principiu doar o întâlnire a corpului uman cu rotavirus și nu prezența imunității, deoarece chiar și cu un nivel semnificativ de anticorpi umorali sunt posibile bolile repetate. Imunitatea cu infecția cu rotavirus nu este pe deplin înțeleasă. Rezistența la infecție se consideră că se datorează în principal imunității locale a celulelor epiteliale intestinale mici, care este asociată cu prezența anticorpilor secretori ai clasei IgA. Acești anticorpi se găsesc, de asemenea, în laptele unei mame care alăptează și, aparent, servesc ca factor în imunizarea pasivă a nou-născuților care, în absența manifestărilor clinice ale bolii cu fecale, pot elibera cantități semnificative de rotavirusuri în mediu și pot infecta copiii prematuri și copiii cu un fund premorbid nefavorabil. Rotavirusurile de serotipuri diferite nu creează imunitate încrucișată și, prin urmare, același copil sau adult poate avea repetate boli datorită altor serotipuri ale virusului. Natura instabilă a imunității la pacienții cu gastroenterită cu rotavirus este de asemenea observată; bolile repetate sunt adesea înregistrate la 1-1,5 ani după infectare.

Caracteristicile procesului epidemic cu infecție cu rotavirus:

- omniprezența distribuției teritoriale;

- sezonieră severă de iarnă sau iarnă-primăvară;

- scăderea dozei infecțioase a patogenului și focarelor înalte în grupurile organizate;

- vătămarea persoanelor din toate grupele de vârstă;

- o proporție mare de cazuri în rândul copiilor sub 2 ani, cu detectarea maximă a bolilor în rândul copiilor din a doua jumătate a vieții;

- activitatea înaltă a apei și căile interne de transport;

- localitatea focarelor de origine, limitată în cea mai mare parte la familie;

- posibilitatea izolării asimptomatice a rotavirusurilor la copii și adulți;

- posibilitatea infecției nosocomiale cu participarea personalului medical și părinților copiilor bolnavi.

Imaginea clinică a infecției cu rotavirus are multe în comun cu manifestările clinice ale bolilor intestinale acute cu o etiologie diferită, ceea ce face dificilă diagnosticarea acestei boli. Cu toate acestea, există o serie de diferențe caracteristice care fac posibilă suspectarea în timp util a acestei boli și efectuarea corectă a măsurilor anti-epidemice și terapeutice.

Perioada de incubație este scurtă și durează de la 15 ore la 3 - 5 zile, dar cel mai adesea - 1 - 3 zile.

Majoritatea pacienților au un debut acut al bolii, când întregul complex de simptome se dezvoltă în primele zile ale bolii. La copiii mici, este posibilă apariția unui subacut, caracterizat prin apariția în primele zile a bolii a 1 sau 2 simptome și prin adăugarea restului de la 2 la 3 zile de boală. Cel mai patognomonic pentru infecția cu rotavirus este deteriorarea tractului gastro-intestinal, care la 60-70% dintre pacienți este combinată cu dezvoltarea simptomelor de leziuni ale tractului respirator. Uneori simptomele catarrale pot precede 3-4 zile de disfuncție intestinală. Sindromul respirator se caracterizează prin hiperemie moderată și granularitatea faringelui, arcade palatului și palatului, congestie nazală, tuse, care, spre deosebire de ARVI, sunt mai puțin pronunțate, nu au tendința de a crește și sunt de scurtă durată (4-5 zile). Diareea apare la 95-97% dintre pacienți. Pentru infecția cu rotavirus se caracterizează prin dezvoltarea gastroenterită, mai puțin enterită. Scaunul este de obicei lichid, apoasă, spumant, slab colorat, fără impurități sau cu o cantitate mică de mucus. La copiii mici, prevalează diaree apoasă, ceea ce explică evoluția mai frecventă a exciziei la această grupă de vârstă. Frecvența scaunelor în medie nu depășește de 4 până la 5 ori pe zi, dar poate ajunge la 15 până la 20 de ori la copiii mai mici. Durata diareei la adulți și copii mai mari este de 3 - 7 zile, la sugari durează adesea până la 10 - 14 zile. Vărsăturile sunt un simptom cardinal și sunt observate la 80% dintre pacienții cu infecție cu rotavirus. Cel mai adesea, apare simultan cu diareea sau precede aceasta. Vărsăturile sunt adesea repetate, dar pe termen scurt (1-2 zile). Vărsăturile repetate și necontrolabile pentru această infecție nu sunt tipice și indică adesea o infecție mixtă. Temperatura, de regulă, nu depășește 38,5 - 39 ° C și este normalizată cu 3-4 zile de boală. Cele mai tipice semne de intoxicare generală sunt slăbiciunea, letargia, slăbiciunea, durerea de cap, amețelile. Severitatea bolii este determinată de dezvoltarea exosicozei izotonice, gradul I-II, mai puțin frecvent gradul III, care este mai frecvent la sugari. În același timp, pierderile de electroliți (Na și K) sunt mici, care trebuie luate în considerare la efectuarea terapiei de rehidratare.

4. Diagnosticul și diagnosticul diferențial

O examinare obiectivă la pacienți a evidențiat letargie, hiperemie conjunctivală și injecție vasculară a sclerei. Limba este acoperită moderat, uscată. Abdomenul este moale, moderat dureros la palpare în zona intestinului subțire. Ficatul și splina nu sunt lărgite. Blind și colon sigmoid moale, fără durere. Tensiunea arterială este redusă. Pulsul nu este congestionat, ci mai degrabă o tendință de bradycardie relativă. Nu există fenomene meningeale. În sângele periferic, la începutul bolii, poate să apară leucocitoză moderată, de la 2 până la 3 zile de la boală există o tendință de leucopenie cu o scădere a numărului de leucocite și o creștere a numărului de limfocite și monocite, ESR nu este accelerată.

În analiza de laborator a urinei există o ușoară albuminurie, microhematuria care trece rapid, o ușoară creștere a numărului de leucocite și este posibilă apariția cilindrilor hialini. Schimbările în urină sunt în concordanță cu severitatea bolii și deshidratarea.

Examinarea microscopică a fecalelor, numărul de leucocite nu depășește 10-15 în câmpul vizual, există un amestec de mucus.

Rectoromanoscopic, este posibil să se evidențieze hiperemia moderată a membranei mucoase a colonului rectal și a colonului sigmoid fără modificări focale.

Gastroenterita rotavirală este împărțită după severitate, care este determinată de intensitatea diareei și de deshidratarea cauzată de ea, precum și de severitatea intoxicației generale. Există trei grade de gravitate a gastroenteritei rotavirusului: ușoară, moderat grea și mai puțin gravă.

Diagnosticul diferențial se efectuează cu salmoneloză, holeră, dizenterie, toxicoinfecții alimentareborne cauzate de microorganisme patogene condiționate, persinioză și alte gastroenterite virale.

Forma gastrointestinală de salmoneloză se caracterizează prin boala simultană a persoanelor care au consumat produse de calitate slabă. De obicei, debutul acut: hipertermie, frisoane severe, vărsături, dureri abdominale severe, scaun fetid profund care își păstrează caracterul fecal, leucocitoză neutrofilă, cu o schimbare a formulei leucocitelor la stânga. Când salmoneloza nu are schimbări în membrana mucoasă a faringelui, ficatul este de obicei mărit. Izolarea agentului patogen în examinarea bacteriologică a fecalelor, vărsăturilor sau lavajului gastric rezolvă diagnosticul.

Conform numeroaselor semne clinice ale masei și rapidității bolii, gastroenterita cu rotavirus poate să semene cu holera. Dar infecția cu rotavirus se distinge printr-un curs mai blând și, în special, prin faptul că nu dezvoltă starea de algidă, precum și prezența schimbărilor tipice ale membranei mucoase a orofaringelui.

Cele mai importante sunt rezultatele cercetărilor bacteriologice în cazul detectării Vibrio cholerae. O situație similară apare și la infecția cu NAG.

Dysenteria bacteriană este caracterizată prin dureri abdominale acute, frecvente, uneori false, urinare, scaune amestecate cu mucus și sânge, sigmoidită marcată, reacție febrilă constantă, modificări patologice în secțiunea distală a colonului conform rectoscopiei. Toate aceste semne, precum și rezultatele cercetărilor bacteriologice, fac ca aceasta să fie relativ ușor de efectuat diagnosticul diferențial pentru forma de colinită a dizenteriei. Cu forma gastroenterică de dizenterie, valoarea rezultatelor examenului bacteriologic crește dramatic.

Diagnosticarea diferențială a gastroenteritei rotavirusului și a toxicoinfectărilor alimentare cauzate de agenții patogeni oportunitici este deosebit de dificilă, având în vedere cunoașterea insuficientă a imaginii clinice a acestor boli. Conform semnificației diagnostice a studiilor de laborator, ar trebui să se acorde prioritate rezultatelor pozitive ale studiilor virologice și imunologice care confirmă natura rotavirusului bolii, mai degrabă decât pe detectarea bacteriilor patogene condiționate în scaunul pacientului.

Pentru forma gastrointestinală de perinoză, este caracteristică o debut mai gradual, prezența, împreună cu gastroenterita, a durerilor în mușchi și articulații; ficatul este de obicei mărit; scaunul este vâscos din cauza unui amestec semnificativ de mucus și uneori sângele este posibil. Leucocitoza este observată în sânge; ESR a crescut.

Sindromul de gastroenterită poate fi proeminent în unele boli virale. Acestea includ infecția adenovirală, care, pe lângă leziunile intestinale, se caracterizează prin conjunctivită, rinită, faringită, amigdalită, bronșită, pneumonie, o creștere a ganglionilor limfatici cervicali, ficat, splină, febră prelungită.

De la enterită și gastroenterită, provocată de enterovirusurile Koksaki și ECHO, gastroenterita rotavirusului este caracterizată de o imagine clinică monosynrodică, în care leziunea intestinală ocupă locul principal. În contrast, în timpul epidemiilor de natură enterovirusă, se constată prezența diferitelor forme clinice ale bolii, "multiformitatea" imaginii clinice, în care simptomele afectării membranelor creierului, pielii și tractului respirator superior pot juca un rol semnificativ.

Diagnosticul diferențial al infecției cu rotavirus cu colibaciloză la copii este cel mai dificil și se poate baza pe următoarele criterii:

- o mai mare debut acut de infecție cu rotavirus comparativ cu colibaciloza, în special cauzată de colibaciloza enteropatogenică;

- recuperarea mai rapidă de la infecția cu rotavirus, chiar și la copii mici;

- frecvența crescută a sindromului respirator în cazul infecției cu rotavirus, dar și severitatea și durata acesteia mai mici.

Cea mai mare dificultate este diagnosticarea infecțiilor bacteriene mixte cu rotavirus, proporția acestora fiind destul de mare în sezonul de iarnă (7 - 10% din totalul OKI).

O caracteristică a clinicii infecțiilor mixte este prezența complexelor de simptome caracteristice ambelor infecții combinate: o creștere a simptomelor de intoxicație, apariția semnelor de modificări inflamatorii în mucoasa intestinului mic și de gros și o recuperare mai lentă.

Spitalizarea copiilor și a adulților suspectați de OCI provocată de rotavirusuri se efectuează în funcție de severitatea bolii clinice și de indicațiile epidemiologice (prezența copiilor slabi în mediul înconjurător, copiii din primul an de viață, participarea la instituțiile preșcolare pentru copii, lucrătorii din industria alimentară și persoanele asimilate acestora incapacitatea de a se conforma regimului anti-epidemic la domiciliu etc.). Copiii sub vârsta de un an cu simptome severe de OCI sunt spitalizați mai întâi. Spitalizarea separată a pacienților cu gastroenterită suspectată de rotavirus și infecții intestinale acute cu o etiologie diferită (secții separate, cutii separate) este obligatorie. Trebuie respectat principiul "umplerii unice" a camerelor (cutiilor).

Tratamentul pacienților cu gastroenterită rotavirus, ținând seama de ideile existente despre patogeneza acestei boli, include un regim de economisire și compensare pentru încălcări ale stării funcționale a intestinului, restabilirea echilibrului hidroelectrolitic și detoxifierea organismului.

La momentul perioadei acute de boală, este prescrisă o dietă 4-B, în care există o restricție severă a carbohidraților (până la 200 g) și o creștere a cantității de proteine ​​(până la 150 g), cu o scădere ușoară a calorii (2400 cal). Cantitatea de zahăr este limitată la 40 g pe zi, legume și fructe. Laptele este exclus. Sarea nu este limitată.

Scopul acestor preparate multienzimice digestive interne, cum ar fi oraz, solizim, somilază, care nu este inferior importului în tratamentul pacienților cu gastroenterită rotavirus (panzinormă, digestal, festal, trienzimă, etc.).

Gradul de deshidratare a organismului este evaluat în mod necesar și se efectuează o terapie care vizează reaprovizionarea pierderilor în exces de apă și de săruri. Atunci când deshidratarea este gradul I - II conform V.I. Soluțiile glucozo-electrolitice sunt administrate pe cale orală la Pokrovsky (rehidron glucosolan), luând în considerare pierderea de lichide și electroliți, iar după deshidratarea gradului III este necesar să se înceapă tratamentul cu soluții apă-sare (trisol, quartosol, chlosol, acesol).

Tactica introducerii soluțiilor se realizează în conformitate cu principiile terapiei de rehidratare.

Pentru a stabiliza circulația normală a sângelui și detoxifiere, puteți introduce soluții coloidale (gemodez, polyglukin, reopolyglukine).

Trebuie subliniat faptul că prescrierea medicamentelor antibacteriene, dacă nu există o infecție bacteriană concomitentă, nu este justificată.

Este recomandabil să se utilizeze medicamente adsorbante și astringente.

Tratamentul infecției cu virus nu este în prezent dezvoltat.

Extrasul de convalescență se efectuează după o normalizare stabilă (în decurs de 2-3 zile) a scaunului și dispariția tuturor celorlalte simptome clinice ale bolii subiacente în absența complicațiilor.

Copiii care frecventează instituțiile preșcolare, lucrătorii din domeniul alimentar și persoanele asimilate acestora primesc un examen virologic o singură dată după dispariția simptomelor clinice.

Restul contingentelor de pacienți nu fac obiectul unei examinări obligatorii de laborator.

6. Diagnosticul de laborator

Diagnosticul de laborator al gastroenteritei rotavirusului nu este în prezent dificil. Dezvoltarea rapidă a sindromului clinic și a șederii spitale pe termen scurt dictează necesitatea utilizării unor metode rapide pentru determinarea etiologiei bolii. Majoritatea metodelor de diagnosticare de laborator recomandate în acest manual vă permit să detectați rotavirusurile în prima zi. Alegerea metodei în fiecare caz este determinată de echipamentul tehnic al laboratorului, precum și de disponibilitatea reactivilor adecvați.

Metodele tradiționale de detectare a modificărilor serologice în serul pacienților (reacția de neutralizare, inhibarea hemaglutinării și fixarea complementului) sunt importante în analiza retrospectivă a bolii. Prin urmare, pentru diagnosticul serologic precoce al infecției cu rotavirus se recomandă determinarea anticorpilor de clasă IgM.

Obiectul studiului virologic al unei persoane bolnave este de obicei fecale. Prezența și distribuția rotavirusurilor în mediul înconjurător sunt detectate prin examinarea probelor de sol, alimente și apă (ape reziduale, apă din rezervoare naturale și artificiale, apă potabilă).

6.1. Detectarea rotavirusurilor în materialul clinic

și în eșantioane de mediu

6.1.1. Pregătirea probelor pentru testare; eșantionare

Atunci când se prelevează eșantioane pentru cercetarea virologică, sunt îndeplinite câteva cerințe generale, luându-se măsuri pentru protejarea materialului împotriva contaminării. Probele se iau numai în recipiente sterile cu dop din cauciuc dens, tencuială adezivă armată. Probe de transport în recipiente cu gheață sau agent frigorific.

6.1.2. Pregătirea suspensiei, clarificarea,

curățarea probelor, îndepărtarea florei bacteriene

Pregătirea probelor de fecale pentru un studiu pe rotavirus include prepararea unei suspensii de 10%, omogenizare, centrifugare la 3000 rpm. în 30 de minute pentru a elimina flora bacteriană. La examinarea obiectelor din mediul înconjurător și al produselor alimentare se efectuează preconcentrarea materialului studiat.

6.1.3. Concentrația particulelor de virus în probele de apă

Concentrarea rotavirusurilor este o condiție importantă pentru creșterea eficienței detectării în corpurile de apă a mediului înconjurător.

Metoda de concentrare a rotavirusurilor utilizând cromatografia de adsorbție pe sticlă poroasă - sticlă macroporous (MPS) - este simplă și convenabilă, folosind volume de apă de la 0,1 la 10 litri. Când o probă este trecută printr-un strat de MPS, virusul este sorbit pe suprafața sticlei. Pentru eluția virusului utilizând soluții care au capacitatea de a determina desorbția virusului. Virusul este îndepărtat din sticlă cu un volum mic de soluție, ceea ce duce la o concentrație de zeci de sute de ori, comparativ cu proba inițială.

Pentru a îmbunătăți proprietățile de adsorbție, preparatele interne de sticlă marca MPS-1000 VGH sunt tratate după cum urmează: se prepară un amestec (1: 1) de 3% H20 și 6 M HCI. Sticla este umplută cu amestecul preparat la o cantitate de 1 volum de sticlă pentru 2 volume de amestec. Se fierbe într-o capotă de fum (fără opritor) timp de 1 oră, respectând măsurile de siguranță. Se spală la pH neutru cu apă distilată. Se usucă la 100 ° C.

Coloană din sticlă, tratată în prealabil cu lichid de silicon, umplută cu sticlă (2-3 cc), înmuiată în apă distilată. La proba de testare (3 l) se adaugă 1 M soluție de MgCl până la o concentrație finală de 0,05 M. Apa este trecută prin coloană la o viteză de 150-500 ml / oră, ajustând debitul folosind cleme. Treceți prin coloană 10 ml dintr-o soluție de eluare: extract de carne 3%, pH 9,0; sau bulion de fosfat de triptoză 1%, pH 9,0; sau 0,1 M Tris HCI, conținând 2 M NaCI, pH 11,0 (soluțiile sunt listate în ordinea scăderii proprietăților lor de eluare). Sorbați fracțiunile cu un volum de 1 ml, pH-ul în fracții este adus la o valoare neutră.

6.2. Detectarea particulelor virale utilizând microscopia electronică (EM) și microscopia imunoelectronică (IEM)

Deoarece conținutul de particule de rotavirus în fecalele pacienților tipici este de obicei ridicat în primele 2-3 zile de boală, metoda EM este utilizată pe scară largă pentru detectarea rotavirusului, care poate fi utilizat pentru detectarea particulelor de rotavirus fără concentrație suplimentară a suspensiei fecale.

Pentru prepararea medicamentelor, se aplică o picătură de suspensie investigată de 10% pe o placă de ceară dentară sau hârtie cerată. Pe o picătură de substrat de peliculă, impuneți o rețea electronică-microscopică. După 1 - 3 minute grila este spălată cu o picătură de apă distilată și o soluție de contrast (soluție 2% de acid fosforotgustat, ajustată la pH 6,5 - 6,6 cu 1 NKOH), excesul căruia după 30 - 40 secunde. scoateți hârtia de filtru și ochiul este uscat. Vizionarea preparatelor se face într-un microscop electronic cu o mărire instrumentală de 30 - 50000x.

Rotavirusurile sunt destul de ușor de detectat prin examinarea EM a suspensiilor fecale în dimensiuni caracteristice și morfologia particulelor virale. Rotavirusurile ar trebui diferențiate de diferitele particule ale virusului și formate asemănătoare virusilor, particule de bacteriofag și flageluri bacteriene găsite în materialul fecal.

Utilizarea tehnologiei IEM face posibilă, în unele cazuri, nu numai creșterea procentului de detectare a rotavirusurilor, dar și dovedirea rolului lor etiologic. Pentru studiul IEM, se amestecă 0,1 ml de ser imun imun diluat 1: 5 cu 0,4 ml de extract de fecal 10%. Amestecul este incubat timp de 1 oră la temperatura camerei și apoi timp de 12 ore la 4 ° C, după care este centrifugat timp de 90 de minute. la 15.000 rpm Supernatantul este drenat și precipitatul rezultat este resuspendat în câteva picături de apă distilată, în contrast cu o soluție 2% de acid fosforotungstic (pH 6,5) și plasat pe grile de obiecte; excesul de umiditate este îndepărtat cu hârtie de filtru. Studiul medicamentelor se efectuează într-un microscop electronic cu o mărire instrumentală de 50000x, analizând cel puțin cinci celule ale rețelei subiectului. În cazul unui rezultat pozitiv, particulele de rotavirus sunt detectate în preparate sub formă de clustere specifice (complexe imune).

6.3. Detectarea antigenului rotavirus în materialul de testare

6.3.1. Obținerea imunoreagentelor

Serurile hiperimune și imunoglobulinele rotavirus specifice sunt obținute prin imunizarea iepurilor, porcilor de guinea, puii de găină.

Antigenul pentru imunizare a fost preparat după cum urmează: 5 ml de suspensie de cultură a rotavirusului SA-II a fost tratată cu tripsină, adăugată la baloane de saltea de 1,5 litri cu un monostrat de celule heteroploide din rinichi de maimuță verde 4647, incubat timp de 60 de minute la 37 ° C; se adaugă mediu de menținere fără ser și se incubează timp de 24 până la 48 de ore la 37 ° C Toată biomasa este supusă la congelare sau sonicare de 3 ori, se adaugă PEG M 6000 la concentrație de 8-10%, se lasă timp de 20 ore la 4 ° C, apoi se centrifughează la 10.000 rpm. 2 ore Peletul este resuspendat în PBS (1/30 - 1/50 din volumul de biomasă). După curățarea cu freon 113, faza apoasă este utilizată pentru imunizarea animalelor și ca antigen în studiile imunologice. Concentrați-vă într-un volum de 1 ml conține cel puțin 10 particule virale.

Imunizarea iepurilor: iepurii sunt injectați intravenos cu 2 ml de preparat de rotavirus în zilele 1, 7, 35, 42 și sângele este luat în ziua 49 după începerea imunizării. În zilele 1 și 35, antigenul este injectat cu un adjuvant complet Freund complet în mai multe puncte din spate.

Fracția de imunoglobulină este precipitată din ser de iepure hiperimun cu soluție apoasă 10% de polietilenglicol (PEG) cu o greutate moleculară de 6000. Precipitatul este colectat prin centrifugare, dizolvat și dializat cu tampon K-fosfat 0,01 M (pH = 7,4) FSB). Concentrația de imunoglobuline determinată spectrofotometric.

Imunizarea porcilor de guinea: animalele sunt injectate intramuscular cu 0,5 ml dintr-un preparat concentrat de rotavirus cu un volum egal de adjuvant complet Freund la ziua 1.14 și 28, prelevarea de probe de sânge la două săptămâni după ultima imunizare.

Imunizarea găinilor: puii de 20 de săptămâni de găini ouătoare ouătoare de hibrizi din rasa albă Leghorn Zarya-17 sunt imunizați intravenos la 1, 14, 28 de zile. În timpul primei imunizări, antigenul este administrat suplimentar intramuscular într-un amestec cu un volum egal de adjuvant complet Freund. Cantitatea maximă de anticorp din gălbenuș este observată după a treia imunizare. Puii pot fi folosiți definitiv după reimmunizare.

Izolarea imunoglobulinelor pui: gălbenușul este separat de proteină din cochilia sau pâlnia Büchner și spălat cu apă de la robinet. Gălbenușul (10 ml) este transferat într-un tub de centrifugare, se adaugă un volum dublu (20 ml) de FSB și se amestecă bine. PEG 6000 se aplică la o concentrație de 3,5% (greutate / volum) și se amestecă timp de 10 minute. la 14000 g. Supernatantul este filtrat printr-o hârtie de filtru într-un cilindru gradat. Se adaugă suplimentar PEG 6000 la o concentrație finală de 12% și se amestecă. Imunoglobulinele precipitate sunt colectate prin centrifugare (10 min. 14000). Precipitatul este dizolvat în 5 ml FSB (1/2 volum de gălbenuș). Concentrația de proteine ​​din preparat este de obicei între 6 și 12 mg / ml.

6.3.2. Metoda de testare imunoenzimatică (ELISA)

Metoda de imunoteste enzimatica (ELISA), bazata pe utilizarea anticorpilor marcati cu o molecula de enzime (peroxidaza), este una dintre cele mai comune si eficiente si specifice metode de detectare a antigenului viral. Utilizați de obicei opțiunile directe și indirecte "sandwich" - opțiuni. Indicatorul de enzime detectat în culoarea reacției cu substratul. Varianta directă ELISA este mai rapidă decât cea indirectă, dar este mai puțin sensibilă și specifică. În formularea unei variante indirecte, se utilizează un conjugat comercial anti-specific de imunoglobuline cu o enzimă; Pentru a preveni interacțiunile nespecifice între conjugat și anticorpii sorbiti pe panou, este necesar să existe seruri antivirale de două specii diferite de animale.

Varianta ELISA indirectă: 0,1 ml imunoglobuline anti-tromtaun din gălbenușul ouălor puilor imunizați în jumătate (48) din godeuri sunt introduse în godeuri. În cealaltă jumătate, imunoglobulinele provenite din ouă puse înainte de imunizare sunt introduse ca un control negativ. Sorpția imunoglobulinelor se efectuează dintr-o soluție cu o concentrație de 5 pg / ml în PBS peste noapte la 4 ° C. Conținutul godeurilor este drenat, godeurile sunt spălate cu PBS-T și 0,1 ml din proba de testare sunt aplicate în PBS-T cu 1% BSA și 0,01 M EDTA în godeurile cu antirotavirus și imunoglobuline normale și incubate timp de 1 oră la 37 ° C

După spălare, se adaugă 0,1 ml de ser anti-rotavirus de iepure diluat la 1: 1000 - 1: 25000 în godeuri în tampon PBS-T. Dozarea optimă a serului este determinată în experimente prestabilite. Panourile sunt închise și incubate timp de 2 ore la 37 ° C. Godeurile sunt spălate și se adaugă 0,1 ml dintr-un preparat comercial de anticorpi marcați peroxidază împotriva IgG de iepure la o concentrație de 1 până la 2,5 pg / ml în conținutul de peroxidază în PBSB-T-BSA și se incubează timp de 1 oră la 37 ° C Godeurile sunt spălate, se adaugă 0,1 ml de amestec de substrat proaspăt preparat (O-fenilen-diamină 0,5 mg / ml în tampon 0,05 M Na-citrat pH 5,0; HO - 0,03%. aveți grijă!)) și se incubează la temperatura camerei la întuneric timp de 30-40 de minute. Reacția enzimatică este oprită prin adăugarea a 0,05 ml de 3 M H SO. Rezultatele reacției iau în considerare vizual sau spectrofotometric. Probele sunt considerate pozitive, densitatea optică a acestora fiind de cel puțin 2 ori densitatea optică a controlului negativ.

6.3.3. Metoda de coaglutinare

Această metodă se bazează pe capacitatea proteinei A Staphylococcus aureus de tulpină Cowan de a se conecta cu fragmentul Fc al IgG și, în timpul formării unui complex specific antigen-anticorp, provoacă fenomenul de aglutinare.

Pentru formularea reacției de coaglutinare este utilizat un reactiv stafilococ uscat comercial care conține proteina A (Pasteur Research Institute of Medicine Electrochemical, Leningrad), care este rehidratat înainte de utilizare într-o soluție 0,1% de albastru de metilen.

Anterior, fiecare seră de ser hiperimunitar este testată pentru prezența anticorpilor antistafilococici. Pentru a face acest lucru, pe o sticlă de sticlă se amestecă volume egale de ser la o diluție de 1: 500 și 10% suspensie de stafilococ. Luați în considerare rezultatele în termen de 5 minute de la educarea aglutinatului. Pentru activitatea serului selectat, care nu conține anticorpi anti-stafilococici la o diluție de 1: 500. Pentru prepararea diagnosticului, 0,01 ml de ser anti-ratavirus diluat 1:10 cu FSB este amestecat cu 0,5 ml suspensie de stafilococ 10%, ținută la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi se adaugă 9,5 ml de FSB (diagnostic). În același mod, stafilococul este sensibilizat cu ser preimun (reactiv de control). Diagnosticul și reactivul de control sunt utilizate în reacția dintre PKA și TRKA.

Pentru fixarea RCA în godeurile în formă de U ale panoului, se prepară 0,05 ml PBS pH-7,4; în două godeuri se face microtitru Takacchi sau dozator 0,05 ml de suspensie 10% de fecale și se prepară diluții în serie de două ori de 1: 2 - 1: 256. La godeurile din primul rând se adaugă 0,05 ml de diagnostic, iar la godeurile din al doilea rând se adaugă 0,05 ml de reactiv de control. Panourile sunt acoperite cu un capac și incubate într-un termostat la 37 ° C - 3 ore. În fiecare experiment, s-a testat anterior o probă de suspensie de fecale pozitivă și negativă pentru rotavirus, precum și lizate de celule infectate cu rotavirusul SA-II, testată anterior prin microscopie electronică.

Luarea în considerare a reacției: rezultatele sunt considerate pozitive atunci când se detectează o "umbrelă" de aglutinare împreună cu diagnosticul, cu un rezultat negativ sau o scădere de 4 ori a titrului în paralel cu reactivul de control. Rezultatele sunt considerate negative atunci când discurile se formează în ambele rânduri paralele. Pentru a elimina coaglutinarea nespecifică în rândurile perechi, suspensia de fecale este adsorbită cu un volum egal de ser normal de iepure la 37 ° C timp de 2 ore, urmată de încălzirea la 80 ° C timp de 45 de minute. Apoi re-experiență în reacția de coaglutinare.

6.3.4. Metoda de reacție în fază solidă a coaglutinării (TRKA)

Această metodă de detectare a antigenilor rotavirus se bazează pe principiile metodei de imunotestare în fază solidă (a se vedea 4.3.2). Cu toate acestea, spre deosebire de cele din urmă, TRCA nu utilizează o enzimă ca etichetă, ci un diagnostic și un reactiv de control (vezi 4.3.3).

Pentru stadializarea TRKA folosiți panouri imunologice cu puțuri în formă de u. Pentru sensibilizare, în godeuri se adaugă 0,1 ml de ser hiperimun, diluat cu tampon carbonat-bicarbonat 0,01 M (pH 9,6) 1: 1000. Panourile serice sunt lăsate timp de 2 până la 3 ore la 37 ° C. Nelegate la anticorpii cu fază solidă sunt îndepărtați prin spălare de trei ori timp de 3 minute. FSBT. După aceea, se vor face 0.05 ml din probele studiate, precum și probele pozitive și negative (2 godeuri pentru fiecare probă) în godeuri și se lasă timp de 2 ore la 37 ° C pentru a forma complexe antigen-anticorp. Un antigen nelegat și impuritățile conexe sunt eliminate prin spălarea triplu a PBS. Apoi, într-un singur godeu se adaugă 0,05 ml de diagnostic stafilococic 0,5%, în al doilea (control) 0,05 ml de suspensie 0,5% de stafilococ sensibilizată cu ser preimun (a se vedea 4.4.3). Incubarea se efectuează fie timp de 1 până la 2 ore la 37 ° C, urmată de plasarea timp de 1 până la 3 ore la 4 ° C sau timp de 18 până la 24 ore la 4 ° C. Rezultatul reacției de aglutinare este luat în considerare vizual: cu o reacție pozitivă, bacteriile aglutinate formează o umbrelă; cu o reacție negativă - bacteriile se stabilesc complet sub forma unui disc.

6.3.5. Metoda de hemaglutinare indirectă

În această metodă, detectarea antigenului rotavirus se bazează pe utilizarea unui diagnostic de anticorpi de eritrocite, care este un eritrocit de oaie sensibilizat de fluidul ascita de imunoglobulină al șobolanilor albi imunizați cu rotavirus SA-II.

S-au testat două diluții de 10% suspensie fecală în godeurile panoului cu ajutorul unui diagnostic eritrocitar. Aglutinarea diagnosticului de eritrocite indică prezența antigenului rotavirus în probă. O descriere detaliată a procedurii de formulare a PHA este prezentată în instrucțiunile anexate la kitul de pregătire (Asociația științifică de producție "Rostepidkompleks", Rostov-on-Don).

Kitul Rotatest se bazează pe hemaglutinarea inversă pasivă și este conceput pentru a detecta rotavirusul în materiile fecale și pentru a detecta anticorpi împotriva rotavirusului în serul de sânge.

6.3.6. Metoda de detectare imunocitochimică a rotavirusului

Metoda se bazează pe determinarea imunochemică a antigenului viral sintetizat în celule ca urmare a infectării lor cu un material care conține virusuri.

Avantajul metodei în comparație cu ELISA este sensibilitatea ridicată, precum și capacitatea de a determina și de a cuantifica infecțiozitatea probei de testare.

Stadializarea experimentului: celulele transplantate ale rinichiului unei maimuțe verzi la o concentrație de 3 până la 10 celule / ml fac 0,2 ml în godeurile panourilor cu fund plat și se incubează la 37 ° C (24 până la 48 de ore). Celulele sunt apoi spălate cu mediu Eagle-MEM. Materialul de testare este diluat în mediu Eagle-MEM, activat timp de 1 oră la 37 ° C în prezența a 10 pg / ml tripsină și adăugat în 0,1 ml în cel puțin 4 godeuri. Controalele pozitive sunt fântânile în care a fost introdus materialul despre care se știe că conține rotavirus. Controale negative: godeuri cu celule și godeuri neinfectate, în care materialul este introdus similar testului, dar nu conține rotavirusuri. Adsorbția se efectuează timp de 1 oră la 37 ° C, apoi se îndepărtează mediul, celulele se spală cu mediu Eagle-MEM. Se adaugă 0,2 ml mediu Eagle-MEM cu 1 pg / ml de tripsină în godeuri și se incubează timp de 48 ore la 37 ° C.

Celulele sunt spălate de două ori cu soluție salină și fixate cu acetonă rece (-20 ° C), incubate timp de 2 ore la -20 °, apoi se îndepărtează acetona. Panoul este spălat de 3 ori cu PBS conținând 0,05% Tween 20 (PBS-T). În godeuri se adaugă 0,1 ml diluat 1: 1000 în ser anti-rotavirus de rabie imună cu PBS-T. Se incubează timp de 2 ore la 37 ° C. După spălarea panoului, la godeuri se adaugă 0,1 ml de anticorp anti-IgG de iepure marcat cu peroxidază (preparat comercial) într-o sondă, la o concentrație de 2 pg / ml de conținutul de peroxidază în PBS cu 1% BSA și se incubează timp de 1,5 ore la 37 ° C.

Panoul este spălat de 2 ori cu PBS-T și 1 timp cu tampon acetat de 0,05 M, pH 5,0. La godeuri se adaugă 0,1 ml dintr-o soluție proaspăt preparată de substrat de peroxidază conținând 10 ml tampon acetat / 4 mg 3-amino-9-etilcarbazol (AEC) dizolvată în 0,5 ml de acetonă și 0,01 ml de peroxid de hidrogen 33%. (Atenție! Colaborarea cu AEC necesită prudență). Incubați timp de 30-40 de minute. în întuneric la temperatura camerei. Reacția este oprită prin spălarea panoului cu apă distilată.

Contabilitatea reacției este efectuată sub microscopul cu o mărire mică. Godeurile de control negativ nu trebuie să conțină celule colorate. Blocurile locale ale celulelor colorate sunt focarele de infecție virală.

6.3.7. Metoda de imunofluorescență

Pentru a identifica antigenul rotavirus utilizând imunofluorescență, se utilizează o linie celulară 4647. Celulele sunt cultivate pe capace sau diapozitive închise în flacoane sau tuburi de penicilină. Cultura infectată este incubată la 37 ° C timp de 24 până la 48 de ore, după care paharele sunt îndepărtate din flacoane, spălate în soluție salină de 0,15 M cu adăugare de tampon fosfat la pH 7,2, clătite cu apă distilată și uscate în aer. Apoi, preparatele sunt fixate în două schimburi (câte 10 minute fiecare) de acetonă chimic pură răcită la 4 ° C.

Preparatele sunt tratate printr-o metodă indirectă într-o cameră umedă. O picătură de ser imun de rotavirus de iepure se aplică celulelor de cultură și se incubează timp de 30 de minute. la 37 ° C, apoi medicamentele sunt spălate de trei ori în FSB și îndepărtează excesul de umiditate. Preparatele umede sunt colorate cu un amestec de volume egale de conjugat anti-FITC și albumină bovină, marcate cu rodamină și incubate timp de 30 de minute. la 37 ° C. După spălarea de 3 ori în FSB, preparatele se usucă în aer. Pentru a elimina fluorescența nespecifică, serul antiviral este adsorbit înainte de utilizare cu un omogenat de cultură celulară normală și conjugatul FITC este tratat cu cărbune activ în conformitate cu metodele standard.

Următoarele controale sunt utilizate ca martori obligatorii: preparate din culturi neinfectate tratate într-un mod similar și preparate din culturi infectate tratate în prima etapă a serului antiviral normal și heterolog de aceleași specii ca serul imun la rotavirus.

În cazul rezultatelor pozitive, se observă o fluorescență strălucitoare distinctă în citoplasma celulelor.

6.4. Metoda de electroforetizare a rotavirusurilor

Metoda se bazează pe identificarea rotavirusurilor utilizând electroforeza pe gel de poliacrilamidă a segmentelor ARN genomice virale. Metoda permite diferențierea tulpinilor de rotavirus pe baza diferențelor în mobilitatea electrophoretică a segmentelor individuale de ARN ale diferitelor izolate și, prin urmare, este larg utilizată în studiile epidemiologice. Metoda nu necesită pre-cultivarea izolatelor, are o sensibilitate ridicată și specificitate absolută.

Metoda este de interes deosebit pentru epidemiologi în investigarea bolilor de grup de focare de infecție cu rotavirus.

Ea poate fi efectuată pe baza laboratoarelor echipate cu aparate de electroforeză.

Pentru analiză, sunt suficiente 0,2 - 0,5 ml de suspensie de fecale de 10-20%. Suspensiile sunt tratate cu freon 113 și sunt incubate cu pronază (0,2 mg / ml, 15 minute) în prezență de dodecil sulfat de sodiu (1%) și etilen-diamină-tetraacetat de sodiu (0,001 M). După adăugarea de 0,3 M acetat de sodiu, ARN-ul este deproteinizat cu un amestec de fenol: cloroform-izoamil alcool și precipitat cu 2,5 volume de etanol (18 ore la -20 ° C sau 2 ore la -70 ° C). Precipitatul este colectat prin centrifugare, dizolvat în apă și se adaugă tampon de disociere. Electroforeza se efectuează conform metodei lui Laemmli în plăci cu gel de 10%. Azotatul de argint (0,011 M) este folosit de obicei pentru a pata ARN într-un gel. După procedura de manifestare în gel, 11 benzi de ARN sunt vizibile, corespunzând segmentului genomic de rotavirus.

6.5. Determinarea imunoglobulinei din clasa M în ser

un pacient cu infecție cu rotavirus prin metoda fazei solide

reacțiile de coaglutinare (TRCA)

În acest caz, în cadrul modificării se folosește principiul reacției de coaglutinare în fază solidă (vezi 4.3.4): pentru sensibilizarea godeurilor din panouri, se utilizează 0,1 ml de ser monospecific de miel comercial împotriva IgM uman, la o diluție de 1: 1000. Panourile sunt incubate timp de 2-4 ore la 37 ° C. Apoi godeurile se spală cu FSBT, se umple cu 3% soluție de gelatină și se lasă timp de 30 minute la 37 ° C. Fântânile au spălat FSBT și au preparat 0,05 ml din serul studiat, precum și serul deliberat pozitiv și negativ, diluat 1: 100 FSBT (2 găuri pentru fiecare ser). La determinarea titrului de anticorpi, sunt examinate diluțiile duble ale probelor testate (1:10 - 1: 1280). Panourile sunt incubate timp de 2 ore la 37 ° C și, după spălare, în godeurile asociate sunt introduse 0,05 ml de diagnostic și de reactiv de control. Reacția este luată în considerare după 1 - 2 ore (vezi mai sus 4.3.4).

Același principiu, modificat de TRCA, este utilizat pentru testarea anticorpilor IgA și IgG pentru infecția cu rotavirus, precum și în analiza colostrului și laptelui pentru lactoglobuline.

Metoda de determinare a imunoglobulinei clasa M în serul pacientului este utilizată atât pentru diagnosticarea precoce a formelor manifestate, cât și pentru diagnosticul lor diferențial cu forme asimptomatice de infecție cu rotavirus.

7. Măsuri anti-epidemice

Fiecare caz de infecție intestinală acută cauzată de rotavirusuri, în special copiii din primul an de viață, precum și copiii care frecventează instituții preșcolare, necesită o analiză epidemiologică atentă pentru a identifica sursa, principalele căi și factori de transmitere în scopul implementării în timp util a măsurilor antiepidemice în focar.

Măsuri destinate identificării și neutralizării sursei de infecție. Detectarea pacienților suspectați de boală este efectuată de către medici din toate instituțiile de sănătate: în timpul vizitelor în ambulatoriu, vizite la domiciliu, examinări medicale ale copiilor din instituții, spitale etc. Pacienții identificați sunt izolați de grupurile de copii. Observarea medicală și tratamentul pacienților pot fi efectuate acasă sau în spital. Copiii care frecventează instituții pentru copii evacuați din spital sau care au terminat tratamentul la domiciliu cu teste de laborator negative sunt admiși la grupurile de copii pe baza unui certificat pediatru. Copiii care au avut WG și continuă să elimine rotavirusurile (sau antigenul rotavirus) cu fecale fără manifestări clinice de infecție pot fi admise la grădinițe și grădinițe de grădinițe-grădinițe supuse organizării de observare medicală continuă și examen de laborator repetat în 2 - 3 săptămâni de la debutul bolii sau izolarea virusului.

Examinarea epidemiologică a focarelor de familie ale pacienților cu FG se efectuează cu boala copiilor sub 2 ani și adulților din numărul contingenților decretați. Epidemiologul merge la instituția copiilor cu un studiu dacă există cazuri repetate de gastroenterită non-bacteriană.

Observarea medicală a copiilor care comunică cu pacienții se efectuează în termen de cinci zile de la data izolației ultimei persoane bolnave.

Testele de laborator pentru rotavirusurile (antigenul) copiilor și adulților care au comunicat cu pacienții, atât în ​​familie, cât și în grupuri organizate, se efectuează pe baza instrucțiunilor infecțio-epidemiologului și epidemiologului, dacă există indicații (apariția în familie sau în echipa copiilor de boli repetate OKI cu o clinică similară) încălcarea gravă a regimului sanitar și igienic, prezența în focar a lucrătorilor a întreprinderilor alimentare și a persoanelor echivalente acestora etc.). Examenul de laborator obligatoriu este supus mamei unui copil bolnav în primul an de viață. Persoanele în care se găsesc rotavirusuri (antigen) în fecale sunt supuse unei examinări clinice aprofundate de către un specialist în boli infecțioase. În absența manifestărilor clinice ale bolii, copiii și angajații din echipă nu sunt izolați.

Angajații întreprinderilor din sectorul alimentar, serviciile de apă etc. în momentul reanalizării și supravegherii medicale sunt angajați în cadrul instalației. Examinarea repetată de laborator a persoanelor care elimină rotavirusurile (antigenul) cu fecale se efectuează conform prescripției medicului infecțios și a epidemiologului cu un interval de 5-7 zile, folosind un examen de laborator cuprinzător.

Dacă apar boli de grup în instituțiile pentru copii, măsurile de carantină se efectuează în termen de 5 zile de la izolarea ultimului pacient.

Instituțiile desfășoară în mod regulat activități sanitare și educaționale menite să prevină infecția cu rotavirusuri.

Măsuri care vizează ruperea mecanismului de transmitere a infecției.

Studiile au stabilit un efect dăunător asupra rotavirusurilor la +70 ° C după 15 minute; când sunt expuse la radiații ultraviolete, rotavirusurile sunt, de asemenea, inactivate după 15 minute.

În ceea ce privește rezistența lor la acțiunea dezinfectantelor utilizate pe scară largă, rotavirusurile sunt aproape de enterovirusuri și hepatită A. Prin urmare, în centrele de infecție cu rotavirus și în spitalele în care există pacienți, se recomandă efectuarea măsurilor de dezinfecție conform regimurilor și utilizarea mijloacelor recomandate pentru hepatita virală A și enterovirus (Anexa N 4 la Ordinul Ministerului Sănătății al URSS nr. 752 din 07/08/81 și Ordinul Ministerului Sănătății al URSS nr. 916 din 08/04/83). O atenție deosebită trebuie acordată manipulării corespunzătoare a mâinilor persoanelor care deservesc copiii, precum și mameloanele, jucăriile, vasele și alte obiecte pentru îngrijirea pacientului.

Se recomandă iradierea ultravioletă regulată. Radiația ultravioletă este efectuată, de regulă, folosind iradiatori - OBN-150 pe 30 de metri cubi. m, OBP-300 60 cu. m camere și altele. Pastile neecranate sunt setate la o viteză de 1 - 1,5 W per 1 cu. m în absența unor persoane (pentru a evita deteriorarea ochilor mucoase), ecranate - la o viteză de 2 - 2,5 W per 1 cu. m, iradierea poate fi efectuată în prezența oamenilor. Timp de dezinfectare - 30 - 40 de minute. Iradierea cu aer trebuie efectuată după curățarea camerei, schimbarea lenjeriei de pat și a altor lucrări legate de formarea aerosolului de praf.

În departamentele specializate ale personalului spitalului trebuie să poarte măști respiratorii.

Organizarea măsurilor sanitare și igienice menite să prevină infecția cu rotavirus se realizează în conformitate cu instrucțiunile și recomandările curente pentru alte infecții cu mecanismul fecal-oral al răspândirii agentului patogen.

Una dintre măsurile eficiente de prevenire a infecției cu rotavirus la nou-născuți este alăptarea lor.

Nu se efectuează prevenirea specifică a infecției cu rotavirus.